|
|
Studium vybraných houbových toxinů Amanita muscaria.
Adámek, Michal ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce) ; Hložek, Tomáš (oponent)
Předkládaná bakalářská práce byla zaměřena na vývoj HPLC-MS/MS metody pro separaci a případnou kvantifikaci hlavních toxinů Amanita muscaria (muchomůrky červené). Po optimalizaci podmínek tandemové hmotnostní detekce byly nalezeny MRM přechody pro muskarin (174 → 57), kyselinu ibotenovou (159 → 113), muscimol (115 → 98) a cykloserin (103 → 75), který byl použit jako interní standard. Měření proběhlo na kolonách Luna Omega 1,6 µm polar C18 v módu RP-HPLC s optimalizovaným složením mobilní fáze 2:98 (v/v) acetonitril/deionizovaná voda s přídavkem 0,1% kyseliny mravenčí v obou složkách a Ascentis Express RP-Amide v módu HILIC s optimalizovaným složením mobilní fáze 70:30 (v/v) methanol/deionizovaná voda s přídavkem 0,5% kyseliny mravenčí v obou složkách. Za optimalizovaných podmínek byly proměřeny kalibrační křivky s rozsahem 0,01 až 10 µg/ml pro RP-HPLC a 0,01 až 25 µg/ml pro HILIC. Byly proměřeny roztoky moči a krevního séra pacienta s otravou Amanita muscaria včetně naředěných verzí těchto roztoků. V moči pacienta byla nalezena kyselina ibotenová a muscimol, v krevním séru muskarin, kyselina ibotenová a muscimol. RP-HPLC metoda poskytla užší píky s nižší retencí a nižší úrovní šumu. Byla provedena extrakce studovaných toxinů z lyofilizovaného klobouku a třeně Amanita muscaria a pomocí metody...
|
host ::
RSS.